人生就是博-尊龙凯时推出的这款检测试剂盒是基于探针法荧光定量PCR原理而设计,具有以下显著特点:
产品特点
1. 即开即用:用户只需提供样品DNA模板,即可快速使用本产品。
2. 优化的组分:经过优化的引物组合,具有极高的灵敏度,确保检测结果的准确性。
3. 阳性对照的提供:试剂盒附带阳性对照,便于有效区分假阴性样品,提高检测可靠性。
4. 高特异性:引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区,避免与其他生物样本DNA发生交叉反应。
5. 多功能检测:适用于定性和定量检测,定量检测时线性范围至少覆盖5个数量级,满足各种检测需求。
6. 反应次数:产品可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应,为实验提供便利。
7. 科研专用:此产品仅限于科研使用,确保科研的专属性。
使用方法
一、样本准备
采用自选方法提取纯化样品DNA,本试剂盒与市面上大多数核酸提取试剂盒兼容。
二、标准曲线样品稀释
由于阳性对照浓度较高,稀释操作需在独立区域进行,以避免污染样品或本试剂盒的其他成分。
1. 准备6个离心管,标记为7,6,5,4,3,2。
2. 向每个管中添加45μL DEPC-H2O,建议使用带芯枪头。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照,充分震荡1分钟,得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。
4. 依次换枪头进行后续稀释,直到得到所需的全部稀释度。
三、试剂配制
根据待检样品数量(N),准备N+2个qPCR管,加入相应成分。
四、模板添加
在每个qPCR管中依次添加2μL模板,按顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板及阳性对照,离心30秒后立即进行扩增反应。
五、扩增反应
将PCR管放置于PCR扩增仪器的对应样品槽,启动扩增程序,根据详细说明书进行设置。
六、结果分析
若制作标准曲线,使用阳性对照浓度的log值与Ct值绘制曲线。若未制作标准曲线,根据标准值判断结果,并确保检测的准确性:
阳性对照的标准:Ct值<30,样品呈现明显指数增长,形成典型S型曲线。
阴性对照的标准:Ct值≥38或无Ct值,则无明显指数增长期和平台期。
样本检测结果的评估:Ct值<35,表示检测到样本中有目标物,结果为阳性;Ct值≥38,则表示样本中未检测到目标物,为阴性。
运输与保存
本产品需要在-20℃低温条件下运输,并保存一年。阳性对照需单独放置,避免与其他试剂交叉污染。
人生就是博-尊龙凯时的检测试剂盒,凭借其高效、可靠的特性,将为您的科研与医疗检测提供坚实的保障。